- 產品簡介
賴氨酰內切酶（LaiAnXianNeiQieMei）又稱賴氨酰肽鏈內切酶Lys-C 內切酶，是一種絲氨酸蛋白酶，開始是由Masaki等人從土壤細.菌中發現并分離得到。該酶具有高度特異性，可特異性切割賴氨酸殘基和 S-氨乙 基半胱氨酸殘基羧基端的肽鍵。也有報道稱具有微量的非特異性切割。該酶是蛋白質序列分析和生物制品生產 中非常珍貴的工具酶。該酶可單獨使用，也可以與其它蛋白酶一起使用，經過消化的蛋白可用于肽圖譜分析以 及目的蛋白的制備。 本品是從重組大腸桿菌中分離純化，再經冷凍干燥得到的重組賴氨酰內切酶粉末。
本品屬于生物化學級別 的基.因工程酶，不含DFP、PMSF和TLCK等酶抑.制.劑，具有兲然賴氨酰內切酶相同的活.力和特異性。
- 產品優勢
? 無動物源性：無動物病.毒、無致病物質、無外源因子污染，安.全性高。
? 純度高：比活高；宿主蛋白殘留小于生物制品限度要求。
? 生產規模 1000L 以上。
? 合規性：生產設備和生產環境符合相關法規要求，符合 GMP 指導原則。
? 質量文件完整：按客戶需求，可提供相關法規支持文件。
- 產品特性
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性狀 |
白色或類白色凍 干粉 |
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酶比活.性 |
≥3.0AU/mg pro. |
| 分子量 |
29.2 kDa±2.9kDa |
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純度 |
單一主條帶（SDS-PAGE） |
| 蛋白含量 |
30%~70% |
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外源 DNA 殘留量 |
≤100ng/mg pro. |
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菌體蛋白殘留量 |
≤100ng/mg pro. |
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蕞佳pH |
8.5~9.5 |
| 溶解性 |
在緩沖液中溶解性良好 |
酶活定義： 30℃， pH9.5 條件下，每分鐘催化底物生成 1μmol 對硝基苯胺的酶量為 1AU。
- 推薦使用方法
【蛋白質的準備】
將蛋白質溶解在 25mM Tris-HCl，pH9.2 的溶液中。溶解性低或者需要變性處理的蛋白質可以用最小體積的 變性劑，如 8M 尿素或 6M 鹽酸胍，在 25℃~37℃條件下孵育 1h 使之溶解。需要做二硫鍵還原處理的蛋白質 可以加入終濃度為 5mM 的 DTT 或β-巰基乙.醇，于 50~60℃孵育 20 分鐘使之溶解。 調整反應溶液體積使 Tris-HCl 為 25mM，尿素為 1M 或更低，鹽酸胍為 0.1M 或更低。
【酶液準備】
稱取所需的酶粉，用 25mM Tris-HCl （pH 9.2）溶解，使酶液濃度為 1-10mg/ml。
【消化反應】
1g 多肽或蛋白質推薦酶的用量在 1~100AU 之間。推薦于25~37℃反應 2~18h。 如果需要終止反應，可以加入乙酸或鹽酸調節 pH 至酸性。
【注意】 為了獲得最.佳的酶切效果，通常需要蛋白處于可溶、變性和二硫鍵還原的狀態，否則需要加大酶用量。 應嚴格控制鹽酸胍和尿素的加入量，尿素高于 1M 或鹽酸胍高于 0.1M將會降低重組賴氨酰內切酶的活力。
- 產品用途
? 生物制品的生產，如胰島素及類似物生產，GLP-1 類似物生產。
? 小分子蛋白或多肽的生產，如美容肽，抗.菌肽、食品風味肽的生產等。
? Lys-X 化合物的酶催化合成。
? 干細胞、原代細胞的培養，作用更加溫和。
- 運輸和儲存穩定性
運輸穩定性：冰袋保溫運輸，活性穩定。
儲存穩定性：凍 干粉在-15~-20℃條件下至少能穩定存放24個月。1mM鹽酸或50mM醋酸溶解后儲存于-15~-20℃，反復凍融10次，無活.性損失。溶解后 2~8℃保存建議不超過7天 ，溶解后-15~-20℃ 保存建議不超過30天 。
- 注意事項和免責聲明
? 在 2M 尿素或 0.1%SDS 可保留大部分活力。
? 本品具有吸潮性，應室溫平衡后再取用。
? 本品僅供研究使用，不得用于動物或人類的診斷或治.療。
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